ປະຕິກິລິຍາຂອງຕ່ອງໂສ້ Polymerase, ຫຍໍ້ເປັນPCRໃນພາສາອັງກິດ, ແມ່ນເຕັກນິກຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນທີ່ໃຊ້ເພື່ອຂະຫຍາຍຊິ້ນສ່ວນ DNA ສະເພາະ.ມັນສາມາດຖືວ່າເປັນການຈໍາລອງ DNA ພິເສດຢູ່ນອກຮ່າງກາຍ, ເຊິ່ງສາມາດເພີ່ມຈໍານວນ DNA ຂະຫນາດນ້ອຍຫຼາຍ.ໃນໄລຍະທັງຫມົດPCRຂະບວນການປະຕິກິລິຍາ, ປະເພດຫນຶ່ງຂອງສານມີບົດບາດສໍາຄັນ - enzymes.
1. ຕາກ DNA
ໃນການທົດລອງໃນຕອນຕົ້ນຂອງPCR, ນັກວິທະຍາສາດໄດ້ນໍາໃຊ້ Escherichia coli DNA polymerase I, ແຕ່ມີບັນຫາກັບ enzyme ນີ້: ມັນຈໍາເປັນຕ້ອງເພີ່ມ enzyme ໃຫມ່ທຸກໆຄັ້ງທີ່ດໍາເນີນຮອບວຽນ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ຂັ້ນຕອນການດໍາເນີນງານສັບສົນເລັກນ້ອຍແລະຍາກທີ່ຈະຂະຫຍາຍອັດຕະໂນມັດຢ່າງເຕັມສ່ວນ.ບັນຫານີ້ໄດ້ຖືກແກ້ໄຂຫຼັງຈາກນັກວິທະຍາສາດໄດ້ແຍກຕົວ Taq DNA polymerase ຈາກ Thermus aquaticus ໂດຍບັງເອີນໃນປີ 1988. ນັບຕັ້ງແຕ່ນັ້ນມາ, ການຂະຫຍາຍ DNA ອັດຕະໂນມັດໄດ້ກາຍເປັນຄວາມເປັນຈິງ.ການຄົ້ນພົບຂອງ enzyme ນີ້ຍັງເຮັດໃຫ້PCRເຕັກໂນໂລຊີທີ່ສະດວກ, ການປະຕິບັດແລະເຕັກໂນໂລຊີທົ່ວໄປ.ໃນປັດຈຸບັນ, Taq DNA polymerase ແມ່ນ polymerase ທົ່ວໄປທີ່ສຸດໃນຊຸດ DNA.
2. PfuDNA
ດັ່ງທີ່ໄດ້ກ່າວມາຂ້າງເທິງ, Taq DNase ມີແມງໄມ້ໃຫຍ່, ດັ່ງນັ້ນນັກວິທະຍາສາດໄດ້ດັດແປງ Taq DNA polymerase ໃນລະດັບໃດຫນຶ່ງເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ສະເພາະເນື່ອງຈາກບໍ່ກົງກັນ, ເຮັດໃຫ້ຜົນການທົດສອບບໍ່ຖືກຕ້ອງ.ແຕ່ການດັດແກ້ຂອງ Taq DNA polymerase ສາມາດຍັບຍັ້ງກິດຈະກໍາຂອງ DNA polymerase ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ.PfuDNA polymerase ສາມາດເຮັດໄດ້ດີສໍາລັບຂໍ້ເສຍຂ້າງເທິງຂອງ Taq DNA polymerase, ດັ່ງນັ້ນປະຕິກິລິຍາ PCR ສາມາດດໍາເນີນການໄດ້ຕາມປົກກະຕິ, ແລະອັດຕາຜົນສໍາເລັດຂອງການຂະຫຍາຍພັນທຸກໍາເປົ້າຫມາຍສາມາດໄດ້ຮັບການປັບປຸງຢ່າງມີປະສິດທິພາບ.
3. Reverse Transcriptase
Reverse transcriptase ໄດ້ຖືກຄົ້ນພົບໃນປີ 1970. ເອນໄຊນີ້ໃຊ້ RNA ເປັນແມ່ແບບ, dNTP ເປັນ substrate, ປະຕິບັດຕາມຫຼັກການຂອງການຈັບຄູ່ພື້ນຖານ, ແລະສັງເຄາະສາຍ DNA ດຽວທີ່ສົມບູນກັບແມ່ແບບ RNA ໃນທິດທາງ 5′-3′.Reverse transcriptase ຕົ້ນຕໍແມ່ນຂຶ້ນກັບກິດຈະກໍາ DNA polymerase ຈາກແມ່ແບບ DNA ຫຼື RNA ແລະດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງບໍ່ມີກິດຈະກໍາ exonuclease 3′-5′.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ມັນມີກິດຈະກໍາ RNase H, ເຊິ່ງຈໍາກັດຄວາມຍາວການສັງເຄາະຂອງ reverse transcriptase ໃນລະດັບໃດຫນຶ່ງ.ເນື່ອງຈາກຄວາມຊື່ສັດຕ່ໍາແລະຄວາມທົນທານຂອງ thermostability ຂອງທໍາມະຊາດ reverse transcriptase, ນັກວິທະຍາສາດຍັງໄດ້ດັດແປງມັນ.
ສໍາລັບPCRການທົດລອງ, ເຄື່ອງບໍລິໂພກຕົ້ນຕໍແມ່ນ: ທໍ່ PCR ສ່ວນບຸກຄົນ, ທໍ່ PCR 4/8-strip, ແຜ່ນ PCR.
Labio ຂອງເຄື່ອງບໍລິໂພກ PCRມີດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້ຂໍ້ດີ:
ແຜ່ນ PCR: ຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ຂອງ cycler ຄວາມຮ້ອນຢ່າງກວ້າງຂວາງ;ຄວາມຄົມຊັດສູງ, ການກໍານົດໄດ້ດີງ່າຍ;ການສະທ້ອນ fluorescence ດີ; ດີການໂອນຄວາມຮ້ອນ;ໄດ້ຮັບການຢັ້ງຢືນ DNase, RNase, DNA, ຍັບຍັ້ງ PCR, ແລະທົດສອບບໍ່ມີ pyrogen.
ທໍ່ PCR ສ່ວນບຸກຄົນ: ທົນທານຕໍ່ການລະເຫີຍ; ດີການໂອນຄວາມຮ້ອນ;ຄວາມຊັດເຈນດ້ານແສງທີ່ດີເລີດ;ຮັບການຮັບຮອງ DNase, RNase, DNA, ຍັບຍັ້ງ PCR, ແລະທົດສອບບໍ່ມີ pyrogen.
4/8-strips PCR tubes: ຝາບາງໆ; ຄວາມຊັດເຈນສູງ; ສະທ້ອນແສງ fluorescence ດີ;ສາມາດນໍາໃຊ້ໃນອຸດສາຫະກໍາການຢາ, ອຸດສາຫະກໍາສະບຽງອາຫານ, ແລະຊີວະສາດໂມເລກຸນ; ຄຸນນະພາບສູງ, ອຸປະກອນ PP ເວີຈິນໄອແລນ; ຮັບຮອງ DNase, RNase, DNA, inhibitors PCR, ແລະການທົດສອບບໍ່ມີ pyrogen.
ເວລາປະກາດ: 09-09-2023